RESUMEN.
Uso de marcadores moleculares para la detección rápida y precisa de trufa negra (Tuber melanosporum Vitt.) en plantas de vivero y plantaciones comerciales de Chile

Cecilia Cordero1, Pablo Cáceres1, Gloria González1, Karla Quiroz1, Carmen Bravo1, Ricardo Ramírez2, Peter D.S. Caligari2, Basilio Carrasco3, and Rolando García-Gonzales1*
 

La truficultura es un rubro agroforestal de creciente interés debido a los altos precios que alcanzan las trufas (Tuber melanosporum Vitt.) en el mercado nacional y la reciente evidencia que es factible su producción comercial en las condiciones de clima y suelo de Chile. En este estudio se evaluó la eficiencia de tres métodos de extracción de ADN a partir de 5 g de muestra del suelo y raíces de plantas de Quercus ilex L. de vivero y de campo micorrizadas con T. melanosporum. La detección de T. melanosporum se desarrolló mediante la técnica de secuencias de amplificación polimórficas cortadas (CAPS) a partir de amplicones generados con los partidores ADL1 (5´-GTAACGATAAAGGCCATCTATAGG-3´) y ADL3 (5´-CGTTTTTCCTGAACTCTTCATCAC-3`) que generó un fragmento de restricción de 160 pb, específico para T. melanosporum que permite discriminar esta especie del resto de las especies del género Tuber sp. La detección directa en un solo paso de T. melanosporum mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con los partidores ITSML (5´-TGGCCATGTGTCAGATTTAGTA-3´) y ITSLNG (5´-TGATATGCTTAAGTTCAGCGGG-3´) generó un amplicón de 440 pb. Los métodos de detección molecular de T. melanosporum desarrollados permitirán evaluar la micorrización en árboles de vivero y campo de forma rápida y precisa. La tecnología brindará mayor protección y seguridad a los productores mediante el control de la calidad del material de plantación y mediante el seguimiento de la permanencia del suelo hasta el momento de la cosecha.

Palabras Claves: Tuber melanosporum, ectomicorrizas, marcadores moleculares, PCR, CAPS.
1Universidad Católica del Maule, Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, Av. San Miguel 3650, Talca, Chile. *Corresponding author (rgarciag@ucm.cl).
2Empresa Agrobriotruf SA, Talca, Chile. 3Pontificia Universidad Católica de Chile, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Vicuña Mackenna 4860, Casilla 306, Santiago, Chile.