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En el secano de la IX Región de Chile, Tiifolium pratense y T. incarnatum son las leguminosas de mayor distribución. Como alternativa de uso de dichas especies, se ha iniciado una linea de investigación que considera diversos tréboles de comportamiento anual. Sin embargo, en el pais no se dispone de cepas de Rhizobium apropiadas para la inoculación de dichos tréboles. Por este motivo se aislaron cepas a partir de plantas noduladas de T. incarnatum, T. alexandrinum, T. subterraneum, T. hirtum, T. resupinatum, T. pratense y T. repens, recolectadas en diferentes localidades de la IX Región. Los ensayos de efectividad se realizaron inoculando plántulas de T. incarnatum, T. alexandrinum y T. pratense, desarrolladas en tubos con solución nutritiva adicionada de agar, utilizándose controles con y sin nitrógeno. Los tubos se mantuvieron durante cinco semanas en cámara bioclimática, con control de temperatura, luminosidad y humedad ambiental. Los resultados indican que existen cepas altamente efectivas, que superan a los controles nitrogenados e introducidos, haciéndose necesario continuar la evaluación con aquellas cepas de Rhizobium más promisorias en invernadero y luego en el campo, a fin de obtener un inoculante que pueda ser recomendado para estas especies vegetales.